Статьи разное
Факторы оксидативного повреждения крови больных эссенциальной гипертонией
Ключевые слова: эссенциальная гипертония, кровь, оксидативное повреждение
Допускается, что в молекулярно-биохимические механизмы патогенеза эссенциальной гипертонии (ЭГ) вовлечены процессы, сопровождаемые развитием оксидативного стресса. Однако при ЭГ систематические исследования, изучающие роль и механизмы оксидативного повреждения экстрацеллюлярных и внутрицеллюлярных анти- и прооксидантных систем, изучены недостаточно. Установлено, что у больных ЭГ первой степени (артериальное давление в диапазоне от 140/90 до 160/100 мм рт.ст.) наблюдается снижение уровня тиоловых групп в плазме и нет корреляции с показателями уровня артериального давления (АД), а активность супероксиддисмутазы (СОД) и каталазы не изменяется. Однако у больных ЭГ второй и третьей степени (уровни АД от 160/100 до 180/110 и >180/>110 мм рт.ст. соответственно) наблюдается снижение активности этих ключевых ферментов антиоксидантной активности, на фоне повышения активности глутатионпероксидазы (ГПО). Изменения активности СОД, каталазы и ГПО в плазме больных ЭГ всех степеней связываются с различием интенсивности оксидативного повреждения активными формами кислорода (АФК) [21]. При этом в результате реагирования АФК с липидными компонентами биомембран (включая и эритроцитарные мембраны) образуются гидроперекиси. Этот деструктивный процесс известен как перекисное окисление липидов (ПОЛ). Далее эти гидроперекиси превращаются в малоновый диальдегид (МДА), который является одним из продуктов ПОЛ и индикатором оксидативного повреждения клеток и тканей, причем эндогенные антиоксидантные системы противодействуют этому процессу и снижают уровень оксидативного повреждения. АФК вовлечены и в процесс нарушения функции эндотелиальных клеток сосудов.
Различные антигипертензивные лекарства помимо гипотензивного действия обладают также антиоксидантными свойстами. До прохождения лечения ЭГ антигипертензивными лекарствами уровень МДА в сыворотке крови повышается, а активность СОД снижается. Так, до прохождения курса лечения ЭГ антигипертензивными лекарствами уровень МДА в сыворотке крови бывает высоким, а активность СОД низкая, однако после трехмесячного курса лечения наблюдается существенное регулирование уровня этих биохимических показателей, на основании чего сделано заключение о том, что ЭГ ассоциируется повышением оксидативного стресса и снижением антиоксидантного статуса [22]. В этих условиях положительный антистрессорный эффект оказывает препарат ацебулол (селективный бета1-адреноблокатор) путем регулирования антиоксидантного статуса в эритроцитах [18]. После шестимесячной терапии больных ЭГ антагонистом кальция – бинидипином наблюдается снижение повышенного уровня АФК продуцируемыми НАДРН-зависимыми оксидазами, локализованными в лейкоцитах. Выявлена корреляция между уровнями АФК систолическим артериальным давлением (САД) и диастолическим артериальными давлением (ДАД) при лечении этим лекарством [23]. Антигипертензивная терапия антагонистом ангиотензина АII кандезартоном и антагонистом кальция амлодипином также снижает уровень клеточного оксидативного повреждения [20]. При атеросклерозе и ЭГ наблюдается стимулирование процесса оксидативного повреждения эритроцитарных мембран (ЭМ), что вызывает повышение уровня холестерина в сыворотке крови, степени гемолиза, снижение уровня глутатиона и текучесть ЭМ, особенно при ожирении. В результате этого снижается тканевая оксигенация [11]. При ЭГ наблюдается также окисление и инактивирование нитроксильного радикала, что вызывает нарушение функции сосудов и изменение АД. При этом терапия ингибитором ангиотензин-превращающего фермента эналаприлом и ингибитором ангиотензина АII лозартаном помимо снижения САД и ДАД существенно снижает уровень МДА в плазме, глутатиона и нитроксила. Этим обусловлен антиоксидантный эффект этих лекарств [13]. Уровень перекиси водорода в плазме крови больных ЭГ также резко повышается. В результате увеличивается и стационарная концентрация высокоактивных гидроксильных радикалов (НО.), которые оказывают деструктивное действие почти на все биосистемы, включая регуляторные системы функционирующего эндотелия сосудов [19]. При этом наблюдается протективный эффект при лечении антагонистами кальция дигидропиридинового ряда [12].
Роль и состояние супероксид-продуцирующих оксидаз при атеросклерозе и ЭГ, их регуляция на клеточном уровне при оксидативном повреждении этих клеток еще полностью не установлены, однако было показано, что экспрессия и регуляция этих оксидаз осуществляется соответствующими цитокинами [17]. При этом НАДРН-зависимые оксидазы участвуют в процессе продуцирования супероксидов и в нефагоцитирующих клетках [16], а человеческие эндотелиальные клетки в культуре клеток экспрессируют мРНК и белок для цитозольного компонента фагоцитирующих супероксид-продуцирующих оксидаз [14].
С разработкой комплексного способа одновременного количественного и качественного определения как известных металлопротеинов антиоксидантной активности (МАА), так и новых типов металлопротеинов прооксидантной активности (МПА) крови и с выявлением их биологической роли [8,9], становится актуальным определение уровня и активности этих металлопротеинов (МП) в крови больных ЭГ для оценки молекулярно-биохимических механизмов патогенеза ЭГ как результата нарушения анти- и прооксидантного статуса крови.
Целью настоящей работы явилось определение характерных изменений уровня и активности МАА и МПА в крови больных ЭГ с неконтролируемым АД (уровень АД›140/90 мм рт. ст.)
Материал и методы
Была обследована кровь больных ЭГ с неконтролируемым АД (14 мужчин и женщин в возрасте 38–69 лет с давностью заболевания 2–4 года). В качестве контроля была использована донорская кровь лиц с нормальным АД.
МАА (Сu-, Zn-СОД, каталаза, полученные из растворимой фракции эритроцитов, церулоплазмин (ЦП) и трансферрин (ТФ) – из сыворотки крови) и МПА (нейтральные изоформы цитохрома b558: цит b558III, b’558III, b558IV, b558’IV и цит b558 – из эритроцитарных мембран, супероксид-продуцирующий липопротеин сыворотки – супрол и цитохром b5 – из растворимой фракции эритроцитов) получали из крови больных ЭГ и донорской крови биотехнологическим способом, избегая использования детергента для солюбилизации белков из ЭМ [5,6].
При этом пробы очищенных ЭМ (по 5мл, смешанные с 0,04 М калий фосфатным буфером, рН 7,4) отделяли для определения О2- - продуцирующей и метгемоглобин (метНb)-восстанавливающей активности цит b558III [9] в гетерогенной фазе. Количество полученных МП определяли измерением плотности максимального оптического поглощения, характерного для цит b5 при 525 нм, для изоформ цит b 558 сыворотки и ЭМ – 530, супрола – 430, ЦП – 610 и ТФ – 470 нм (голоформа).
Супероксиддисмутазную активность фермента и О2- - продуцирующую активность супрола и цит b558III [8] определяли нитротетразолиевым синим (НТС), путем вычисления процента подавления (в случае СОД) или стимулирования (в случае супрола и цит b558III) образования формазана (при 560 нм). За единицу активности СОД принимали то количество фермента, которое вызывает 50% ингибирование образования формазана при восстановлении НТС супероксидными радикалами. За единицу О2- - продуцирующей активности супрола или цит b558III принимали количество белка, способного стимулировать образование формазана на 50%. Каталазную активность фермента определяли перманганатометрическим методом, рассчитав количество белка, расщепляющего 0,1М перекиси водорода за 1 мин при 20о C. МетНb-восстанавливающую активность цит b558III определяли in vitro, используя свежеполученный метНb (ферриНb) крови человека. При этом величина оптического поглощения альфа-полосы (при 565 нм) метНb составляла 0,9, а величина поглощения бета-полосы используемого цит b558III (при 530 нм) в реакционной смеси составляла 0,04. Непосредственно в кварцевых кюветах спектрофотометра к 2,5 мл раствора метНb добавляли 0,2 мл цит b558III или 0,2 мл ЭМ, смешанных с 0,04 М калий-фосфатным буфером (КФБ), рН 7,4. После быстрого перемешивания реакционной смеси ее инкубировали в покое в аэробных условиях in vitro в течение 10–15 ч при 30оC. Затем после быстрого смешивания реакционной смеси была определена кинетика восстановления метНb до ферроНb путем измерения снижения интенсивности плотности альфа-поглощения метНb уже в течение 1,5–2 ч при 30оC. Это снижение прямо пропорционально образовавшемуся ферроНb, который имеет максимальное оптическое поглощение при 555 нм. Для определения степени рилизинга (самоотщепления) из ЭМ последние были инкубированы с 0,04 М КФБ в течение 5 дней при 4оC и уровень отщепленной суммарной фракции изоформ цит b558 ЭМ определяли в супернатанте после соответственной ионообменной хроматографии [10].
Оптические спектральные измерения осуществляли на спектрофотометре «Specord UV-VIS» (Германия) с длиной оптического пути 1 см. Статистическую обработку полученных результатов осуществляли методом вариационной статистики Стьюдента-Фишера с определением критерия достоверности (Р).
Результаты и обсуждение
Сразу же после поступления в клинику больных ЭГ в крови их наблюдалось значительное повышение уровня цит b5–переносчика электрона для НАДРН-зависимой метНb-редуктазы в цитозоле эритроцитов (табл.1). Это свидетельствует о
Таблиц 1 Относительное изменение (%) уровня активности МПА и МАА крови больных ЭГ с неконтролируемым АД по сравнению с 100% контрольными показателями донорской крови, p‹0,05,n=8
наличии сердечно-сосудистого фактора риска – гиподинамии у больных ЭГ [2]. При этом увеличивались уровни МПА в ЭМ, и в частности ключевой изоформы цит b558 ЭМ – цит b558III, с увеличением его НАДРН-зависимой супероксид-продуцирующей и метНb-восстанавливающей активности в гомогенной и особенно в гетерогенной фазе (в ЭМ). Увеличивались и уровни других изоформ цит b558 ЭМ. Это свидетельствует о существенном изменении гемопротеинового состава ЭМ [4], как результат оксидативного повреждения этих мембран АФК. При этом стабильность ЭМ существенно снижалась в результате повышения степени рилизинга цит b558 из ЭМ [10], проникновения Нb в ЭМ и вхождения в нестабильное комплексное соединение с цит b558. Из-за повышения супероксид-продуцирующей активности цит b558III увеличивалась стационарная концентрация супероксидных радикалов, что, с одной стороны, является положительным явлением для стимулирования метаболических процессов с их участием в ЭМ, с другой – продуцированные супероксиды могут пагубно влиять на состояние окружающих биосистем и в первую очередь на фосфолипидные остатки ЭМ. Повышение метНb-восстанавливающей активности цит b 558III особенно в гетерогенной фазе (в ЭМ) есть ответ адаптационных механизмов организма для сохранения кислородного гомеостаза и полноценной оксигенации клеток, причем усиление метНb-восстанавливающей активности цит b558III – характерное явление для ряда сердечно-сосудистых заболеваний [1]. При ЭГ несколько повышается уровень и активность супероксид-продуцирующего липопротеина сыворотки – супрола со снижением его стабильности (увеличивается степень агрегации и потери растворимости этого липопротеина). Это связано с увеличением уровня супероксидов, соответственно и перекиси водорода (как продукта ферментативного дисмутирования супероксидов [15]), и НО. - радикалов, которые стимулируют ПОЛ фосфолипидных остатков самого супрола, вызывая его агрегацию. Приведенные изменения супрола могут вызывать увеличение вязкости сыворотки, образование атеросклеротических бляшек внутри сосудов и нарушать гемодинамику при ЭГ.
У больных ЭГ с неконтролируемым АД активность антирадикальной защитной системы сыворотки крови и эритроцитов существенно снижена (характерный синдром ЭГ) [18, 21–23] (табл.1), это закономерно, если учесть то обстоятельство, что заметно увеличены уровень и активность МПА сыворотки и эритроцитов. При этом продуцированные супероксиды могут превращаться в НО.- радикалы, которые способны необратимо инактивировать Cu,Zn-СОД, каталазу и ЦП. При повышенных концентрациях гидроксильные радикалы также необратимо деградируют и МПА-изоформы цит b558 ЭМ in vitro [7]. С другой стороны, в ЭМ уровень СОД и каталазы невысокий, по сравнению с цитозолем эритроцитов, соответственно невысока и стационарная концентрация перекиси водорода [15] и гидроксильных радикалов. Однако это не означает, что в ЭМ невозможен процесс деструктирования изоформ цит b558 гидроксильными радикалами или другими активными интермедиатами аэробного метаболизма. Это зависит и от других факторов, сопутствующих дестабилизации ЭМ при различных заболеваниях [3].
Снижение уровня МАА и повышение уровня МПА создает определенный дисбаланс между ними с характерным изменением антиоксидантного статуса (АС) (расчетный суммарный уровень МАА) и прооксидантного статуса (ПС) (расчетный суммарный уровень МПА) сыворотки крови и эритроцитов (табл.2). Полученные результаты служат основанием для применения комбинированной терапии с экзогенными препаратами антиоксидантной активности, в первую очередь хелаторами НО.-радикалов и препаратами с СОД-миметической активностью.
Таблица 2
Изменение АС и ПС (%) в сыворотке крови и эритроцитах у больных ЭГ с неконтролируемым АД по сравнению с 100% контрольными показателями донорской крови, Р‹0,03, n=8
Таким образом, при неконтролируемой ЭГ молекулярно-биохимические механизмы оксидативного повреждения компонентов крови связываются:
- с резким снижением стабильности ЭМ, как результат увеличения степени рилизинга изоформ цит b558 из ЭМ и комплексообразования Нb с этими изоформами,
- с соответственным увеличением уровня МПА,
- увеличением НАДРН-зависимой супероксид-продуцирующей и метНb-восстанавливающей активности цит b558III,
- со снижением стабильности супрола на фоне снижения уровня МАА, вызывая нарушение физиологического равновесия между МАА и МПА и изменение АС и ПС сыворотки крови и эритроцитов.
Литература
- Алексанян Серг.С., Симонян Г.М., Алексанян А.С., Симонян М.А. Вопросы теорет.клин.мед., 2004, 7 (4), с. 25–28.
- Акопян В.П., Симонян М.А., Манукян А.А., Симонян Р.М., Акопян А.А. Бюлл.эксп.биол.мед., 2001, 11, с.527–529.
- Симонян Г.М. Мед.наука Армении НАН РА, 2002, XLII, 2, с. 101–105
- Симонян М.А., Галоян А.А., Симонян Г.М. ДНАН РА, 1997, 97, с. 62–66.
- Симонян М.А., Симонян Г.М. Способ получения металлопротеинов крови. Лицензия изобрет. 341 Армпатента. Ереван, 1997.
- Симонян М.А., Симонян Г.М., Симонян Р.М. Способ получения цитохромов из мембран эритроцитов. Лицензия изобрет. 908 Армпатента. Ереван, 2001.
- Симонян Г.М., Симонян Р.М., Симонян М.А. В кн.: Актуальные вопросы военной медицины. Гос.Мед. университет им.М.Гераци, Ереван, 1999, с.48–51.
- Симонян Г.М., Симонян Р.М., Бабаян М.А., Карапетян А.В., Симонян М.А. Мед.наука Армении НАН РА, 2003, XLIII, 1, с.30–34
- Симонян Р.М., Симонян Г.М., Бабаян М.А., Симонян М.А. Мед.наука Армении НАН РА, 2004, XLIV, 1, с.43–46.
- Симонян Р.М., Симонян Г.М., Бабаян М.А., Симонян М.А., Галоян А.А. Мед.наука Армении НАН РА, 2003, XLIII, 3, с. 13–18.
- Cazzola R., Randanelli M., Russo V.S. et al. J.Lipid.Res., 2004, 45(10), p.1846–1851.
- Digiesi V., Fiorillo C., Cosmi L. et al. Clin.Ther., 2000, 151(1), p.15–18.
- Donmez G., Derici U., Erbar D. et al. Jpn. J.Physiol., 2002, 52(2), p.435–440.
- Jones S/A., O’Donnel V.B., Wood J.D. et al. Am.J.Physiol., 1996, 271(4Pt2), H1626-H1634.
- Fridovich I. Annu.Rev.Biochem., 1995, V.64, p.97–112.
- Fukui T., Lassegue B., Kai H. et al. Biochim.Biophys.Acta, 1995, 1231(3), p.215–219.
- Kalinina N., Agrotis A., Tararak E. et al. Atherioscler. Thromb.Vasc.Biol., 2002, 22(12), p.2037–2043.
- Krouf D., Bouchenak M., Mohammed M. et al. Hypertens. Res., 2005, 28(2), p.107–112.
- Lacy F., Kailasam M.T., O’Conner D.T. et al. Hypertension, 2000, 36(5), p.878–884.
- Muda P., Kampus P., Zilmer M. et al. J.Hypertens., 2005, 23(1), p.105–112.
- Simin D.V., Mimic-Oka J., Pljesa-Ercegovac M. et al. J.Hum.Hypertens., 2006, 20(2), p.149–155.
- Tandon R., Singh M.K., Garg H. et al. Natl.Med.J.India, 2005, 18(6), p.297–299.
- Yasumari K., Maeda K., Nakamura M. et al. Hypertens.Res., 2005, 28(2), p.107–112.
![](images/calendar.png)
Читайте также
Определяющим для старения самообновляющих тканей с возрастом является резкое снижение скорости их самообновления – снижение физиологической регенерации, а также снижение индуцированного клеточного роста...
![](images/calendar.png)
Ключевые слова: качество жизни, апробация, самооценка, Каталог
Введение
Настоящее сообщение является фрагментом исследования, посвященного влиянию головокружения на качество жизни студенческой молодежи (на примере вузов Еревана)...
![](images/calendar.png)
Ключевые слова: самооценка, состояние здоровья, врачи, студенты
Проблема состояния здоровья лиц различных профессий приобретает большую актуальность в связи с радикальными изменениями в современном обществе. Особый интерес в этом отношении представляет...
Большой потенциал повышения эффективности медицинской помощи заложен в реформировании сестринского дела [1,3] Повышение профессиональной роли медсестры, расширение круга ее обязанностей требует усиления контроля...
![](images/calendar.png)
Ключевые слова: контроль качества медицинской помощи, многопрофильный стационар, объем госпитализации больных, риск врачебных ошибок
Актуальность исследования. Формирование комплексной системы контроля качества медицинской помощи началось в середине 90-х годов прошлого века...
![](images/calendar.png)
Ключевые слова: кислородный стресс, антирадикальная активность, фенольные соединения, природные антиоксиданты, нейропротективная активность
Растения практически постоянно подвергаются сильному кислородному воздействию. Процесс фотосинтеза является оксигенным...
![](images/calendar.png)
Ключевые слова: психологические факторы здоровья, личностные характеристики, тревожность, депрессивные состояния, эмпатийные тенденции
Адаптивность как свойство организма, характеризующееся успешностью приспособления человека к различным ситуациям, их изменениям, а также эмоциональному (внутреннему или внешнему) принятию окружения...
![](images/calendar.png)
Ключевые слова: планирование медицинских кадров, заболеваемость, смертность, дефицит, дисбаланс
Формирование отечественного здравоохранения как отрасли народного хозяйства в советский период происходило в условиях достаточного или даже избыточного количества врачебных кадров...
![](images/calendar.png)
Конечный результат деятельности врача – здоровье пациента – во многом определяется состоянием здоровья самих врачей, включающем понятия как общего благополучия, так и удовлетворенностью работой и условиями труда. Литературные данные...
В ключе разработки оптимальных вариантов организации медицинской помощи населению, важное значение приобретают исследования по проблеме оптимизации лечебно-профилактической помощи населению отдаленных регионов...
Ключевые слова: митохондрии, активные формы кислорода, окислительный стресс, антиоксиданты, апоптоз
Дыхательная цепь митохондрий (МХ) снабжает клетку энергией, трансформируя энергию окисления субстратов дыхания кислорода в форму трансмембранной разности электрохимических потенциалов ионов водорода на сопрягающей мембране...
![](images/calendar.png)
После распада СССР во вновь образовавшихся государствах, в том числе и в Республике Армения, начался процесс реформирования системы здравоохранения (СЗ)...
Ключевые слова: здоровье учащейся молодежи, учеба в вузе, состояние здоровья, структура заболеваемости
Здоровье является одним из ведущих ценностей человеческой жизни, определяя реализацию индивидуальной жизненной программы в конкретных условиях внешней среды...
![](images/calendar.png)
Всемирная Организация Здравоохранения (ВОЗ) определяет народную медицину как “включающую связанные со здоровьем различные знания и верования, подходы и практики, средства растительного, животного и минерального происхождения...
Ключевые слова: хемилюминесценция (ХЛ), модельные системы, периодическая болезнь, диметилформамид, нонан, гломерулонефрит
Свободнорадикальное окисление липидов (СРО) – перманентный процесс для любых нормально функционирующих мембран [1]. Интенсивность этого процесса обусловлена...
![](images/calendar.png)
![](images/white_bl.gif)
![](images/white_br.gif)
![](images/white_tr.gif)
![](images/white_tl.gif)
САМЫЕ ЧИТАЕМЫЕ СТАТЬИ
-
Нормы роста и веса детей – данные ВОЗ
-
Зеленые выделения из влагалища: причины и лечение
- Анатомо-физиологические особенности дыхательной системы у детей
-
Насморк с кровью: причины симптома и способы лечения
- Анатомо-физиологические особенности сердечно-сосудистой системы у детей
- Анатомо-физиологические особенности пищеварительной системы у детей
- Анатомо-физиологические особенности мочевыделительной системы у детей
- Сравнительная характеристика параметров функции внешнего дыхания (обзор литературы)
- Современные представления о норме и патологических отклонениях размеров восходящей аорты при приобретенных пороках сердца
- Анатомо-физиологические особенности детей
- Анатомо-физиологические особенности костно-мышечной системы у детей
- Паллиативная химиотерапия рака: основные понятия и особенности (oбзор литературы)
-
Что можно и что нельзя делать после удаления аппендицита
-
Увеличенные яичники: симптомы, причины и лечение
-
О чем говорит головная боль за ухом? Причины, симптомы и лечение
-
Характер мужчины проявляется в выборе позы для секса
-
Желтые выделения из влагалища: причины и лечение
-
Рвота у ребенка без температуры: возможные причины
-
Армянская ассоциация медицинского туризма (ААМТ)
- Применение летрозола для стимуляции овуляции
- Врожденные аномалии и пороки развития
-
КАТИОНОРМ – представитель нового поколения искусственных слез для симптоматической терапии синдрома “сухого глаза”
-
Арам Бадалян: Родинку трогать нельзя?
- Применение противоспаечных средств в профилактике спаечной болезни живота (oбзор литературы)
-
Вздутие живота при месячных: 7 способов справиться с неприятным ощущением
-
Онкология является самой быстроразвивающейся отраслью медицины: интервью с Левоном Бадаляном
-
Как избавиться от лямблий — 25 эффективных рецептов народной медицины
-
Компресс при ангине: будет ли полезным прогревание горла?
-
Лечение марганцовкой
- Некоторые новые подходы к системной терапии метипредом больных ревматоидным артритом
- Медицинские информационные системы.Информационная система для интегрального фармацевтического и здравоохранного мониторинга
- Подходы к оперативному лечению костно-хрящевых экзостозов
-
Фармацевтическая опека
- Повреждения при родах
-
Курение марихуаны влияет на потенцию
- Инциденталома надпочечников
-
Почему противозачаточные увеличивают грудь?
-
Как снизить риск инсульта. erebunimed.com
- Применение индинола и эпигаллата при аденомиозе
-
Новейшие достижения онкологии в МЦ «Наири»: интервью с Артемом Степаняном. nairimed.com